紫外可見分光光度計通過測量物質對紫外到可見光波段(190-900nm)的吸收特性,實現定量與定性分析。其核心測量模式及對應場景如下:
1.透射比模式(Transmittance,T%)
原理:測量樣品對入射光的透射比例,公式為
T%=I0I×100%,其中I為透射光強,I0為入射光強。
適用場景:
溶液濃度測定:通過繪制標準曲線(如比爾-朗伯定律),快速計算溶液中溶質濃度,如環境監測中的重金屬離子(如鉛、鎘)檢測。
薄膜厚度與均勻性分析:測量光學薄膜(如濾光片、涂層)的透射率,評估其厚度及表面均勻性。
材料透光性研究:分析玻璃、塑料等材料的透光性能,優化光學器件設計。
2.吸光度模式(Absorbance,A)
原理:吸光度與透射比呈負對數關系(A=−log10T),直接反映樣品對光的吸收能力。
適用場景:
定量分析:基于比爾-朗伯定律(A=εbc),定量測定溶液中核酸、蛋白質、藥物成分等濃度,如DNA純度檢測(A260/A280比值)。
化學反應動力學研究:通過實時監測吸光度變化,分析反應速率常數、平衡常數等動力學參數。
水質檢測:測定水體中硝酸鹽、亞硝酸鹽等污染物的濃度,符合環保標準(如GB5749-2022)。
3.光譜掃描模式(SpectralScan)
原理:連續掃描樣品在紫外-可見波段的吸收光譜,獲取特征吸收峰位置與強度。
適用場景:
物質定性鑒定:通過比對標準光譜庫(如NIST數據庫),識別未知化合物結構,如藥物中間體、有機染料分析。
純度評估:檢測樣品中雜質吸收峰,評估化學試劑或藥品的純度等級。
配合物組成研究:分析金屬離子與配體形成的配合物結構,如鐵-鄰二氮菲配合物的特征吸收峰(510nm)。
4.動力學模式(KineticMode)
原理:固定波長下連續監測吸光度隨時間變化,計算反應速率。
適用場景:
酶活性測定:通過監測酶催化反應中產物或底物的吸光度變化,計算酶活性單位(如U/mL)。
光催化反應研究:分析光催化劑在光照下降解有機污染物的效率,優化反應條件。
藥物釋放研究:模擬體內環境,監測藥物從載體(如納米粒、水凝膠)中的釋放速率。
5.多波長模式(Multi-Wavelength)
原理:同時測量多個特定波長下的吸光度,提高分析效率。
適用場景:
多組分混合物分析:通過選擇各組分的特征吸收波長(如雙波長法測定血紅蛋白濃度),實現同時定量。
復雜體系研究:分析血液、尿液等生物樣品中多種成分的協同作用,如肝功能指標(總膽紅素、直接膽紅素)聯合檢測。
總結
紫外可見分光光度計的測量模式覆蓋了從簡單濃度測定到復雜動力學研究的廣泛需求。透射比與吸光度模式適用于常規定量分析;光譜掃描模式用于定性鑒定;動力學模式聚焦反應過程;多波長模式則提升多組分分析效率。根據實驗目標選擇合適模式,可顯著提升分析精度與數據可靠性。